BD Accuri C6 Plus流式細胞儀是一種可以快速檢測細胞體積、數(shù)量、周期和表型的分析技術(shù)。使用激光作為發(fā)光源，經(jīng)過聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上。這使得細胞或微粒上的熒光染料被激發(fā)，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。光散射信號在前向小角度進行檢測，這種信號基本上反映了細胞體積的大小。前向散射光(FSC)的強弱與細胞的大小相關，而側(cè)向散射光(SSC)的強弱則與細胞內(nèi)的顆粒多少相關。
 

　　熒光信號的接收方向與激光束垂直。經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不同波長的熒光信號。這些信號用于檢測細胞上的特定標記物，如表面蛋白或DNA含量；主要由流動室和液流系統(tǒng)、光源與光學系統(tǒng)、信號收集與信號轉(zhuǎn)換系統(tǒng)以及計算機與分析系統(tǒng)四部分組成。具有分選功能的流式細胞儀還包括分選機制；收集到的信號由計算機系統(tǒng)進行分析，可以定量檢測單個細胞的多項指標，從而提供關于細胞群體特性的詳細信息。
 

　　BD Accuri C6 Plus流式細胞儀的啟動流程：
 

　　1、檢查所有瓶中的液面高度。
 

　　2、輕輕推開樣品支架，在上樣針處放上一根裝有至少2ml過濾去離子水的管子。
 

　　注意：樣品支架可以安放多種管子，包括任何品牌的12x75mm的管子，以及大多數(shù)離心管(不蓋蓋子)。
 

　　3、把樣品管上到適當?shù)奈恢?，拉出樣品支架來支撐管子，支架會自動鎖在合適的位置。
 

　　注意:樣品管在上樣針頂端并不形成密封。當將上樣針插進樣品管時，注意不要使上樣針彎曲或者頂在管子外側(cè)。
 

　　4、用力按BD C6流式細胞儀前方的電源鍵，啟動C6，在啟動期間，CFlow軟件的黃色燈會亮，同時C6的泵會開始運行。當打開電源時，C6會自動用鞘液沖洗液流管線。這一啟動過程持續(xù)大約5分鐘。
 

　　注意：當C6啟動時，不要打開儀器的蓋子，因為打開蓋子會干擾激光預熱的過程，并延長啟動時間。
 

　　5、當CFlow軟件的燈變綠，顯示CFlow已經(jīng)連接并準備完畢(CFlowareconnectedandready)，上過濾去離子水運行至少15分鐘，然后再進行樣本檢測。
 

　　6、對BD C6流式細胞儀進行質(zhì)控檢測，請參閱CFlow用戶指南(CFlowUser’sGuide)了解使用C6提供的質(zhì)控小球進行質(zhì)控檢測操作的細節(jié)。
 

　　BD Accuri C6 Plus流式細胞儀的關閉操作：
 

　　1、在上樣針處放上裝有2ml過濾去離子水的管子，此時先不要在CFlow軟件中選擇任何空的樣品孔。
 

　　2、設定時間2分鐘。
 

　　3、點擊RUN按鍵。
 

　　4、在上樣針處放上裝有2ml去污液(Decontamination Solution,AccuriPart#KR-200)的管子。
 

　　5、選擇一個空的樣品孔。
 

　　6、設定時間2分鐘，設定流速為高速。
 

　　7、點擊RUN按鍵。
 

　　8、當運行結(jié)束，從上樣針移去清洗液管子。
 

　　9、放上裝有2ml過濾去離子水的管子，此時不要選擇任何空的樣品孔。
 

　　10、設定時間2分鐘。
 

　　11、點擊RUN按鍵。
 

　　12、當運行結(jié)束，將管子留在上樣針處。
 

　　13、按電源鍵，清洗液流循環(huán)會自動運行大約13分鐘，然后C6會自動關機。
 

　　14、在C6關機的過程中，儀器會自動運行液流循環(huán)，先后使用去污液和鞘液清洗管路和上樣針。
 

　　注意:不是必須在關閉流式細胞儀前退出CFlow軟件或關閉計算機。